闹“心”的药物---生物素导致的cTnT-hs假阴性一例

作者 | 王晓燕

单位 | 同济大学附属东方医院胶州医院

肌钙蛋白T（TnT）是参与横纹肌收缩的一种调节蛋白。由于心肌肌钙蛋白同骨骼肌肌钙蛋白的基因编码差异^[1]，其组织特异性高，被《心肌肌钙蛋白实验室检测与临床应用中国专家共识》、ESC和NICE列为诊断急性心肌梗死（AMI）的Ｉ级a类推荐。

cTnT-hs主要强调了准确性和敏感性两个方面，目前被广泛接受的是由Fred Apple医生提出的标准，也被IFCC/NACB等学术组织认可。2015年ESC推荐的0/1分诊流程、2016我国非ST段抬高急性冠脉综合征（NSTE-ACS）诊断和治疗指南、2017年亚太共识声明中1/3检测流程，都明确规定了cTnT-hs的临床应用路径，在实践中也从根本上改变了急性冠脉综合征（ACS）诊断、预后判断、治疗和危险分层的格局。但在临床检验工作中，cTnT-hs的检测受到多种内外源因素的干扰，考验检验医师真假辨别的剧情不断上演。

患者，男性，44岁，一周内无明显诱因“反复胸闷痛”伴发胸痛5小时入院，疼痛位于心前区，持续不缓解。无双下肢水肿，无端坐呼吸，无视物旋转，无头痛，无乏力，无恶心呕吐、晕厥等。既往有“高血压3级，痛风”病史，否认肝炎、结核等传染病史，否认食物、药物过敏史。

急诊造影：左主干无狭窄；前降支弥漫性斑块浸润，近端约50%狭窄，血流TIMI3级；回旋支弥漫性斑块浸润，中段约95%狭窄，血流TIMI3级；右冠状动脉细小，中段约80%狭窄，血流TIMI3级。

心电图：窦性心动过缓，下壁导联ST-T改变。

首诊心肌损伤三项：cTnT-hs:0.019ng/mL（0-0.014），MYO:152ng/mL（28-72），CKMB（质量法):296ng/mL（0-5）。

初步诊断：

1. 冠心病 急性非ST段抬高型心肌梗死

2. 高血压3级（很高危）

3. 痛风

患者体格检查和相关辅助检查都支持心肌梗死的诊断，但主治医生对cTnT-hs的检测结果投来疑惑的目光，希望检验科协助检验结果的解释。

“若有召，召必回”。秉承着“不破楼兰终不还”的检验精神，我们开始了抽丝剥茧的求索：

1. 检测双向模式，排除错差检验。

2. 样本状态正常，样本量约3mL，离心彻底，无肉眼可见溶血、脂血。

3. 当日cTnT-hs质控在控，无失控发生。

4. 样本复测，结果为0.021ng/mL，两次数据接近，排除随机误差。cTnT-hs检测平台为cobas e 801原装系统，配套试剂，

5. 考虑假阴性可能，查阅试剂说明书，检验方法的局限性如图1。该思维导图显示，造成检验结果假阳性的因素有很多，假阴性的结果，因检测不受hook效应影响，所以外源性药物和内源性生物素引起我们关注。

图1  cTnT-hs检测方法的局限性（说明书）

6. 通过与患者及家属的沟通，得知患者半月前在某宝购买“进口保健品”，规律持续服用，以期改善发量稀疏和发际线后移的状态。通过链接详情查阅其有效成分为生物素,每粒含量高达1000mcg。

7. 根据cTnT-hs试剂说明书提示，并咨询罗氏厂家技术工程师，8小时后进行cTnT-hs的重采重测，检测结果为2.646ng/mL。虽然AMI发作后，cTnT-hs有独特的释放剂量-时间曲线，但从发作时间来看，首次cTnT-hs的检测明显受到了生物素的干扰。

8. 剖析影响机制（图2-3）：cTnT-hs的检测为双抗体夹心法，“夹心三明治”模式为生物素化心肌肌钙蛋白T特异性单克隆抗体-抗原-钌复合物标记的心肌肌钙蛋白T单克隆特异性抗体，当血清中存在生物素时，与cTnT-hs发生竞争性抑制，干扰链霉亲和素捕获抗原的能力，从而导致检测结果假阴性。

图2  cTnT-hs检测原理（电化学发光）

图3 电化学发光法图示

生物素（Biotin）为B族维生素之一，又称维生素H、维生素B7、辅酶R（Coenzyme R）等。是20世纪30年代在研究酵母生长因子和根瘤菌的生长与呼吸促进因子时，从肝中发现的一种可以防治由于喂食生鸡蛋蛋白诱导的大鼠脱毛和皮肤损伤的因子。

生物素是秃头一族的救星，不但防止落发及头顶见光颇见功效，还能预防现代人常见的少年白发。另外也在维护皮肤健中也扮演着重要角色。口服生物素迅速从胃和肠道吸收，血液中生物素的80%以游离形式存在。

通过文献及资料查阅，生物素干扰是最新的热点研究之一。2017年11月，美国食品和药物管理局（FDA）公布近期收到一份由于生物素干扰而导致肌钙蛋白测定不准确引起患者死亡的报告，提醒临床医生及实验室工作者：大剂量补充生物素（Biotin）可能会导致实验室检测结果出现误差，从而引起临床误诊误治^[2]；

国际顶级医学期刊-《新英格兰医学杂志》也发布了多例有关生物素干扰的误诊案例^[3]；Trambas等人的研究结果显示，当生物素浓度达到31.3ng/mL时，肌钙蛋白水平会显著地降低，降低比例接近20%^[4]。在2021年AACC会议上，Fred.S Apple也特别提到了FDA关于生物素的警示信带来的生物素关注热点，提醒检验和临床医生在诊断时应留意生物素的影响。不要因为生物素造成的假阴性结果，漏诊造成患者死亡。

FDA建议^[5]：“如果实验室检测结果与患者的临床表现不符，应考虑将生物素干扰作为可能的原因。”在临床实践过程中很多患者可能受到专业知识限制而根本不了解自己是否服用生物素，对生物素可能存在的干扰毫不知情。当出现检验结果和临床不符合时，需要实验室专业人员在第一时间评估实验室可能存在的风险，加强与临床的沟通。

目前，我们对生物素如何干扰临床检测的了解，仍然是冰山一角。生物素的服用剂量、服用时间及受影响的项目类型等，仍需要进一步系统的研究评估。生物素干扰的风险应该得到临床和检验共同的高度重视，通过临床与检验的携手，为患者提供更加优质的服务。

点评专家：李玉杰主任技师

在实验室免疫检验领域，生物素的应用已非常普遍。“生物素-链霉亲合素”系统是上世纪70年代末发展起来的一种生物反应放大系统。基于该系统可特异并高效地放大检测信号，提高检测的灵敏度，市面上很多检测产品使用了该方法学。使用这类试剂时，患者如果服用了外源性生物素，血液中高浓度的游离生物素可能会干扰链霉亲和素捕获目标分析物的能力。检验专业人员需要了解本实验室内系统平台的检测原理，明确外源性生物素干扰的检测项目类别，并及时与临床沟通，给与专业检验意见。

参考文献：

[1]李欣悦，耿巍，刘素芬，等.高敏肌钙蛋白T对慢性肾衰竭非透析患者急性心肌梗死的诊断价值[J].河北医科 大学学报，2021，42（1）：12-16.

[2]Biotin (Vitamin B7): Safety Communication  -May Interfere with Lab Tests  -From FDA websitehttps://www.FDA.gov/Safety/MedWatch/SafetyInformation/SafetyAlertsforHumanMedicalProducts/ucm586641.

[3]Biotin Treatment Mimicking Graves’ Disease. N Engl J Med. 2016；375:7.

[4]Association of Biotin Ingestion With Performance of Hormone and Nonhormone Assays in Healthy Adults. JAMA. 2017；318(12):1150-1160.

[5]Michael O'Riordan. Biotin Supplements Can Interfere With Cardiac Troponin Tests: FDA. TCTMD. November 28, 2017.

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