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新装凝血仪APTT缩短的原因分析

日期:2020-09-09 15:25:16 来源: 检验医学微信公众号 作者:潘慧娟 点击:


作者 | 潘慧娟(来宾市妇幼保健院检验科)

点评者 | 蒋爱琼(来宾市妇幼保健院)



【案例经过】


2019年底我们喜迎新院搬迁,同时我们也购进了很多新仪器,心里很是高兴。这批新仪器里面就包括了一台新的凝血仪,装机调试一切顺利,下一步进入预实验阶段。


在预实验质控时我们发现在凝血常规四项质控APTT测定结果缩短,而后单独复查APTT质控可通过,当时考虑为随机误差并未在意。


我们挑取了本院20份标本进行预实验检测后发现APTT缩短比率相对高,考虑到我院标本来自孕产妇居多,而孕产妇在孕后期处于高凝状态。


为了排除患者因素造成的APTT缩短,我们抽取我科室4位男同事及6位未孕女同事的血样进行检测,经过对10位正常人血浆及20人份孕产妇的结果进行统计(正常参考值20-40S),统计结果如表1。


image.png


通过对比发现30%的正常人也出现了APTT缩短的情况,这与孕产妇组的结果表现一致,提示是患者本身因素造成的结果缩短。


我们将对比结果反馈给厂家工程师,工程师建议我们在抽血摇匀后静置15分钟,让抗凝剂与血浆反应达稳定状态后再检测。


为此我们抽取了10份门诊患者标本进行试验性检测,抽取血样摇匀后5分钟离心进行第一次凝血常规四项检测,待20分钟后进行APTT项目的单独检测。


通过对比,我们发现每份标本单独检测APTT的结果都较同时测四项时的APTT结果延长5~10s不等。这一发现让我们甚是高兴,我们发现似乎可以通过延长抗凝时间来消除APTT缩短的现象。


但很快新的问题就出来了,该方法需抽血后静置15分钟以达平衡,而急诊凝血标本要求30分钟内出结果,如果患者同时做凝血四项+D2+FDP检测,那么就会超过时效耽误临床对患者的抢救。


既然上述方法在实际工作中行不通,我们得继续寻求解决问题的办法。


在工程师的建议下,我们更换了凝血管的厂家,本以为看到了一线希望,但更换厂家后并未达到我们预期的效果。采用新订购回来的凝血管检测APTT的结果与原先使用的凝血管区别不大,由此我们推断问题应该不是出在凝血管上。


到底哪个地方出了问题呢?为了找出原因,工程师亲自来到科室,从抽血到离心全程把控后发现我们所用的离心机离心半径不足,离心效果不佳,要求我们换用离心半径大的离心机分离血浆,我们采纳工程师建议后发现结果没有明显改善。


正在我们一筹莫展时,一次不经意的机会,我们同事观察5个标本后发现同一标本如果单独测凝血PT、APTT、TT三项的时APTT的结果正常,而同时测PT、APTT、TT、Fbg时APTT结果缩短(见表2)。


image.png


经了解我室凝血仪有两根加样针,一根试剂针一根样品针,
而凝血四项的检测顺序是先Fbg后到APTT,考虑试剂污染可能性大


故之前我们通过延长抗凝时间或者更改抗凝管的方法并不能解决APTT缩短的现象,而我们之前延长抗凝时间后单独测定APTT结果正常是因为仅单独测定APTT项目,未受试剂污染的因素。


经过与工程师沟通,由于无法改变测试顺序,故在APTT试剂吸样前增加了一次前冲洗,问题得以顺利解决。


【案例分析】


在我们分析本案例前,我们需要明确APTT的反应原理及试剂组成。


APTT的检测是在37℃下以白陶土激活凝血XII和XI,以部分凝血活酶代替血小板提供凝血的催化表面,在Ca2+参与下,观察乏血小板血浆凝固所需时间[1]。在反应过程前后任何一个影响反应过程的因素都会造成反应时间的缩短或者延长。


我们来分析下造成APTT测定时间的缩短有哪些因素:


第一,检测人群的因素:

孕妇在妊娠的过程中各类凝血因子的分泌随着孕周的增加而逐渐升高,慢慢的向高凝状态倾斜,以满足顺利分娩的目的。


第二,标本因素:

(1)抗凝剂未能达到理想的抗凝效果:当抗凝效果不佳时血液离体后就会被激活,使血浆提前进入战备状态,当加入Ca2+后缩短了反应的平台期,而迅速进入反应期,从而造成APTT检测时间缩短。


当标本有微小凝块时,说明抗凝效果不好,凝血标本的凝血系统被提前激活,而凝血因子未被大量消耗,造成APTT缩短[2]。当抽血量超过2ml时,造成抗凝剂不足Ca2+过剩,凝血系统提前激活,发生微小凝固造成APTT缩短[3]


(2)标本溶血:溶血标本是由于抽血过程中造成红细胞破坏,红细胞膜上的磷脂释放入血,而磷脂是促凝物质,造成APTT检测结果缩短[4]

第三,检测中的因素:

(1)离心不足[5]APTT所需的是乏血小板血浆,当离心力不够时,血浆中就会残留有血小板,为反应提供了过量的反应表面,造成APTT缩短。


(2)试剂污染:这是造成本案例中APTT缩短的主要原因,Fbg试剂为过量的凝血酶试剂,当APTT试剂被污染时,检测样本中的凝血酶增加,加速了APTT反应速度,造成APTT缩短。


【案例总结】


本案例中,由于新仪器装机,质控靶值还在累计阶段,未能明确提示异常。当我们新装一台仪器,如果发现某一项检测结果不稳定,单独重复检测后可以达到预期效果。或者试剂效期明显缩短,需要频繁更换新试剂才能达到良好的质控监测效果时,我们可以首先考虑试剂污染的可能性,让我们在分析问题时少走弯路。




    
专家点评

我们在日常的检验工作中,发现结果异常时,首先要查看质量控制工作是否做好。质量控制分为分析前、分析中、分析后质量控制。文中在检测凝血四项时发现APTT结果缩短,首先通过正常人群与孕妇人群结果比对排除标本因素,其次通过标本采样、试管、离心等方面查找原因,均未找到APTT缩短的原因。一次不经意的发现,查找出APTT缩短为试剂干扰引起。

分析中的质量控制涉及到的因素主要有:试剂、仪器、质控品。我们可以逐步的排查,质控在控、仪器运行正常的前提下,考虑是否为试剂方面的原因引起。而提到试剂,我们往往想到的都是试剂过期,保存不当变质等因素,很少考虑到试剂干扰的因素。实际上,由于试剂干扰对检验结果造成的影响已经有过不少报道,尤其是在生化方面。而其他检验项目,关于试剂干扰引起结果异常的报道相对比较少。

本文提醒我们,在做检验工作尤其是新仪器按照时,必须充分了解仪器、试剂的检测原理,发现问题后才能及时的解决。






【参考文献】

[1]尚红.全国临床检验操作规程[M].4版.北京:人民卫生出版社,2014:96

[2]禹香菊.影响凝血四项测定的因素分析.[J].河南.河南职工医学院学报,2009,21(3):267-269

[3]石忠娟.浅析标本采血量对出凝血检测结果的影响.[J].哈尔滨.中国伤残医学,2014,22(2)186-187

[4]张丽仙.溶血标本对活化部分凝血酶时间测定的影响.[J].重庆.检验医学与临床.2010,7(3):256-257

[5]吴刚.标本放置时间、离心时间以及溶血与否对凝血检测结果的影响分析.[J].北京.中国现代药物应用.2020,14(1)228-229



END


(责任编辑:xsq)

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