Gut: 准确的液体活检诊断非酒精性脂肪性肝炎和肝纤维化

美国食品和药物管理局(FDA)和欧洲药品管理局(European Medicines Agency)批准治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的药物需要在不加剧纤维化的情况下改善炎症的组织学，或改善NASH的消退和纤维化。虽然组织学仍然是金标准，但其局限性包括观察者内和观察者间的可变性，但它也需要有创性的肝脏活检。

图片来源: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35820779/

近日，来自意大利圣心天主教大学的研究者们在Gut杂志上发表了题为“Accurate liquid biopsy for the diagnosis of nonalcoholic steatohepatitis and liver fibrosis”的文章，该研究所提出的新的液体活检在诊断NASH或肝纤维化的存在和严重程度方面是准确、敏感和特异的，并且比目前使用的生物标志物更可靠。

非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的临床诊断和新药批准需要侵入性肝活检。本研究的目的是确定NASH和/或肝纤维化的非侵入性生物标志物。这项多中心研究包括250名患者(发现队列，n=100名受试者(减肥手术与非酒精性脂肪性肝炎-勇敢试验)；验证队列，n=150(NASH和肝纤维化液体活检-Libra试验))，组织学证实的非酒精性脂肪肝(NAFL)或NASH伴或不伴纤维化。

采用液质联用(LC-MS/MS)技术对单核细胞和肝星状细胞(HSC)进行蛋白质组学分析，同时用流式细胞仪检测外周血中CD14+CD16单核细胞中PLIN2和RAB14的表达。神经网络分类器用于预测NASH和NASH分期的存在或不存在。Logistic Bootstrap回归用于评估预测肝纤维化的准确性。

使用PLIN2平均荧光强度(MFI)结合腰围、甘油三酯、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和有无糖尿病作为协变量的NASH算法在发现队列中的准确率为93%，在验证队列中的准确率为92%。研究发现队列的灵敏度和特异度分别为95%和90%，验证队列的灵敏度和特异度分别为88%和100%。

NAS水平预测的受试者工作特征下面积(AUROC)在发现队列中为83.7%(CI为75.6%~91.8%)，在验证队列中为97.8%(CI为95.8%~99.8%)。该算法包括RAB14 MFI、年龄、腰围、高密度脂蛋白胆固醇、血糖和ALT水平作为协变量来预测肝纤维化的存在，在发现队列中的AUROC为95.9%(CI 87.9%~100%)，在验证队列中的AUROC为99.3%(CI 98.1%~100%)。

研究发现队列的准确率为99.25%，灵敏度为100%，特异度为95.8%，验证队列的准确率为97.6%，灵敏度为99%，特异度为89.6%。这种新的生物标志物优于目前使用的FIB4、非酒精性脂肪性肝病纤维化评分和天冬氨酸氨基转移酶(AST)/血小板比率，与超声二维剪切波弹性成像相当。

激光扫描NASH/纤维化代表性受试者的单核细胞、HSC和肝细胞的激光扫描共聚焦免疫荧光

图片来源: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35820779/

总之，使用外周血单核细胞PLIN2和RAB14作为生物标志物的新的液体活检试验在诊断NASH和/或肝纤维化方面是可靠的。在NASH和肝纤维化的诊断和治疗中，Plin2和RAB14有可能取代基于侵入性肝活检的组织学。

由于代谢性肝病的流行性质，诊断NASH和肝纤维化的快速和成本效益测试可以研究它们在普通人群中的流行情况，并监测生活方式、手术和药物干预的影响。

Giulia Angelini et al. Accurate liquid biopsy for the diagnosis of nonalcoholic steatohepatitis and liver fibrosis. Gut. 2022 Jul 12;gutjnl-2022-327498. doi: 10.1136/gutjnl-2022-327498.